产品货号:
WH0167
中文名称:
Klenow酶(缺失3'-5'外切酶活性)
英文名称:
Klenow Fragment(3'-5'exo-)
产品规格:
1.5kU|10kU
发货周期:
1~3天
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Klenow(3'-5' exo-)是DNA Klenow Fragment的突变酶。该酶在模板和引物存在的条件下,以dNTP作底物,沿5'-3'方向催化与模板互补DNA的合成。通过点突变改造,使本酶同时失去了3'-5'外切核酸酶的活性和切刻平移活性。本制品是通过大肠杆菌表达的重组酶。分子量大小约为68.1kDa。本制品浓度为。
- 通过点突变改造使得本酶的5'-3'聚合酶活性更强。
- 酶比活性高,稳定性好,与其他酶兼容能力强。
- 在二代测序(NGS)应用中,主要用于文库构建过程中平端双链DNA片段的加“A”反应。
- 双脱氧法DNA序列测定(Sanger法)。
1单位活力定义为在37℃、30分钟内,将10nmol dNTP掺入到酸不溶物质中所需的酶量。
组分 | 1.5kU | 10kU |
Klenow酶(3'-5' exo-,50U/μL) | 30μL | 200μL |
10×BLue Buffer | 500μL | 2×1.5mL |
储存条件:-25℃~-15℃保存。
20mM Tris-HCl(pH7.5@25℃),0.1mM EDTA,1mM DTT,50%甘油。
性质 | 描述 |
蛋白纯度 | >99% |
酶活性 | 10000U/mg |
单链外切酶活性 | 500U酶中,<10.0% |
双链外切酶活性 | 500U酶中,<10.0% |
双链内切酶活性 | 500U酶中,未检出 |
宿主基因组污染 | 500U酶中,<10个拷贝 |
UDG酶活性 | <20U/mL |
- 在NGS文库构建过程中,一般按终浓度0.1U/μL的量加入Klenow (3'-5' exo-)。也可根据实验具体情况来调整用量。
- 反应条件:37℃,30min。
- 反应结束以后,后续一般会进行产物纯化操作。
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